Serological surveillance of Crimean-Congo hemorrhagic fever virus in Hungary and RNA interference as an effective method of inhibiting viral replication

Abstract

Az értekezés egyik elsődleges fő célja a CCHFV magyarországi megjelenésének vizsgálata a vadon élő rágcsálók körében a természetben előforduló CCHFV szeroprevalencia értékelésével. Ennek megvalósításához a következő célokat tűztük ki: CCHFV rekombináns nukleokapszid fehérje (rNP) előállítása; C57BL/6 egerek immunizálása CCHFV rNP-nel a poliklonális antitest előállításához; immunvizsgálatok (dot-blot, Western-blot, immunfluoreszcencia vizsgálat) optimalizálása; rágcsáló szérumminták előszűrése dot-blot vizsgálattal, majd immunfluoreszcencens vizsgálat megerősítés céljából a CCHFV antitest kimutatása érdekében; CCHFV szeroprevalencia meghatározása a rágcsáló populációkban. 3 Másik fő célja a disszertációnak az RNS interferencián alapuló antivirális módszer alkalmazása a CCHFV ellen. Ennek megvalósításához a következő célokat tűztük ki: siRNSek tervezése és szintézise; siRNS-ek transzfekciója sejtekbe és a transzfekciós kontrollok optimalizálása; optimális siRNS koncentráció megtalálása; siRNS-ek CCHFV-t gátló hatásának megállapításához az RT-ddPCR rendszer optimalizálása; CCHFV replikációt szignifikánsan gátló siRNS-ek meghatározása.